畜禽大肠杆菌的实验室分离与鉴定方法

范围

本方法规定了用于动物源大肠杆菌分离与鉴定的方法。

本方法适用于各种动物中大肠杆菌的分离与鉴定。

设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其它设备和材料如下。

1.冰箱：2℃～4℃和-20℃。

2.恒温培养箱：36℃±1℃。

3.电子天平：感量0.1g。

4.显微镜：10×～100×。

5.生物安全柜。

6.生化鉴定卡或商品化试纸条。

7.采样管或商品化采样棉拭子。

8.微量加样器：1μL～1000μL。

9.吸头（与微量加样器匹配）。

培养基和试剂

1.运送培养基

2.麦康凯琼脂

3.大肠杆菌阳性血清

大肠杆菌分离与鉴定程序

大肠杆菌分离与鉴定程序见下图。

操作步骤

1.采样 

选择养殖场或屠宰场，灭菌棉拭子采集动物肛门或泄殖腔样品，置入运送培养基中，保存时间不超过48小时。

2.大肠杆菌的分离

A.拭子接种于麦康凯琼脂平板，36±1℃培养18～24h；

B.挑取粉红色、边缘光滑的可疑菌落，麦康凯琼脂纯化一代，

C.纯化后可疑菌落接种营养琼脂平板纯化，36±1℃培养16～18h，待进一步细菌鉴定。

3.大肠杆菌的鉴定

对于已纯化的菌落，可使用微生物生化鉴定系统或者生化拭条进行生化鉴定。

必要时，采用大肠杆菌标准血清进行血清型鉴定。

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